液氮罐在生物學(xué)實(shí)驗中的應用
一、在細胞培養過(guò)程中的使用
細胞培養的一般過(guò)程,主要包括準備、取材、培養和凍存復蘇4步。為保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般用一196℃液氮溫度,將細胞收集至凍存管中加入含保護劑(一般為二甲基亞砜或甘油)的培養基,以一定的冷卻速度凍存,最終保存于液氮中。在極低的溫度下,細胞保存的時(shí)間幾乎是無(wú)限的。
目前美國標準細胞庫或細胞銀行(ATCC)液氮凍存有3200個(gè)已經(jīng)過(guò)鑒定的細胞系(1992),其中包括來(lái)自正常人和各種疾病患者的皮膚成纖維細胞系和來(lái)自不同物種的近75個(gè)雜交瘤細胞株。
二、胚胎冷凍保存技術(shù)
胚胎冷凍保存技術(shù)是指在低溫條件下利用低溫保護劑保存胚胎的一門(mén)技術(shù)。這一技術(shù)是20世紀后半葉隨著(zhù)人工授精技術(shù)廣泛應用而產(chǎn)生的,目前已成為了現代生命科學(xué)研究必備的手段之一。動(dòng)物胚胎的冷凍保存原理就是因為低溫降低了胚胎內的變質(zhì)反應速度,溫度越低,胚胎保存時(shí)間就越長(cháng)。
目前已研究出多種胚胎冷凍保存方法,包括慢速冷凍法、快速冷凍法、一步冷凍法、直接移植冷凍法和玻璃化冷凍法等。
|